基于实验的鹿茸治疗三种动物疾病疗效分析

本实验建立肝纤维化动物模型采用了 CC14 诱导的方法，建模成功后使用鹿茸干细胞治疗，观看其治疗效果。结果显示大鼠肝纤维化动物模型建立成功，鹿茸干细胞在其治疗方面有很好的疗效。本实验选用苯甲酸雌二醇联合黄体酮，通过肌肉注射的方法建立动物模型。在建模成功后使用鹿角盘治疗。结果显示大鼠乳腺增生动物模型建立成功，鹿角盘在其治疗方面疗效显著。本实验用打孔器在大鼠背部打孔的方法建立皮肤损伤动物模型，在建模成功后使用鹿茸尖部 RM 层提取物治疗。结果显示大鼠皮肤损伤动物模型建立成功，鹿茸尖部提取物具有促进伤口愈合及皮肤再生的效果。
前 言

随着兽医行业的不断发展，人们对动物的热爱有增无减，人们对兽医行业的重视也不断地在提高。动物患病后多数选择治疗而不是淘汰，特别是对于珍贵野生动物及濒临灭绝动物，同时疾病的治疗药物是否存在副作用也备受人们的重视。近年来动物的肝脏疾病、乳腺疾病、皮肤损伤疾病时有发生。

肝乃是五脏之一，是体内不可或缺的消化腺，肝脏的功能以代谢为主，具有排毒、解毒、免疫凝血、储存血液以及代谢等功能，也是肝糖的储存地点，肝脏还能产生胆汁，促进消化系统的消化作用[1]。虽然肝脏有较强的储存及修复能力，但是肝脏的健康不断遭受着渐进性疾病的威胁，这些慢性疾病对肝脏造成了巨大的伤害，其尚有的修复能力无法将其恢复到健康状态。据统计近年来肝病在动物身上频频出现，肝病的发展首先从肝炎开始，肝炎发展到一定阶段就会出现肝纤维化，随着进一步的恶化就会引起肝硬化。庆幸的是，肝纤维化时期是可逆转的，所以抓住治疗肝纤维化的时期是治疗肝病的重中之重[2]。本实验为解决动物在肝脏方面的疾病建立肝纤维化动物模型[3]。据查阅资料显示，肝纤维化不是独立的疾病，肝病在犬、猪、鸭等动物以及一些野生动物体内频频出现，人类也备受该疾病的困扰[4,5]。目前治疗动物肝病一般都是从改善饮食，营养性疗法，以及应用抗生素的疗法。抗肝纤维化采用的是皮质类固醇激素，以及青霉素等，这些疗法见效慢，而且长时间使用激素类药物会对动物的生长产生影响[6]。人类在摄取动物性食品后，激素则会沉积在人的体内，对人们的机体也会造成极大的威胁。鹿茸属于一种中药，长期服用对身体没有副作用，也可以避免饮食及营养法见效慢，抗生素对机体损伤及产生耐药性的缺点。为了治疗患病动物(特别是宠物、珍贵野生动物及濒临灭绝动物)和更好的发展畜牧业，需要建立相关的肝纤维化模型为治疗肝纤维化提供指导。为此综合实验的价值性以及工作量等情况，本实验建立了大鼠肝纤维化动物模型，并在建模成功的基础上，依据本团队多年来对鹿茸的研究经验，以及查阅鹿茸在该疾病方面的研究资料，选择一组合理可靠的药物治疗浓度对鹿茸干细胞(Antler stem cell, ASC)的治疗效果进行评价，在检验鹿茸在该病治疗方面有显著的治疗作用的前提下，我团队将对鹿茸的治疗机理，不同浓度治疗效果等进行细化的研究，为后续肝纤维化以及肝病的治疗提供依据。

第一篇 文献综述

第一章 三种动物模型

1.1 肝纤维化动物模型

1.1.1 肝纤维化的发生

肝纤维化是一个病理生理过程，肝内的结缔组织发生异常的增生是该病的重要表现形式，肝纤维化的发生可由各类致病因子所导致[13]。每个肝脏损伤的修复阶段都离不开肝纤维化这一过程，如果肝脏疾病长时间没有治愈就会导致肝硬化的发生[14]。因此肝纤维化并不是一个单一的疾病，每种肝脏疾病都会经历肝纤维化，是慢性肝脏疾病发展到肝硬化乃至肝癌的必经之路[15]。肝纤维化疾病有很多病因[16]，其主要有感染性的，先天性的代谢缺陷以及接触某些化学毒物等都会引起这一疾病，其中病毒性肝炎、自身免疫性肝病、遗传和代谢疾病、肝脏淤血等在动物中都比较常见，各种营养及内分泌障碍，各种病毒、细菌、寄生虫感染，还有各种有毒物质等都会引起动物的肝纤维化[17,18]。肝脏发生肝纤维化其实也是保护肝脏的一种手段。肝纤维化可以限制炎症的区域，这个时期肝脏会对肝纤维化进行修复，此时引起肝脏损伤的因素被消除，肝脏便能回复正常，可是没有合理地消除引起

疾病的因素，就会导致肝脏的进一步恶化，发展成肝硬化或者可怕的肝癌。综上所述肝纤维化的治疗十分有意义，治疗肝脏疾病首选的就是治疗肝纤维化，因此治疗肝纤维化重中之重，肝纤维化时期治疗肝病，应当好好把握这一环节。

1.2 乳腺增生动物模型

1.2.1 乳腺增生的发生

乳腺增生症(Hyperplasia of mammary glands, HMG)主要是纤维结缔组织、乳腺导管、乳腺腺泡、以及导管上皮细胞发生增生的疾病[27,28]。现代医学认为，乳腺组织由多种激素作用其细胞上含有多种激素的受体，因此机体激素一旦紊乱将严重影响乳腺组织，乳腺增生的发病机制多种多样，其中最为主要的是由于激素的紊乱。乳房上具有雌激素的受体，其发育情况受激素的控制，体内的雌、孕两种激素的比例是维持乳腺细胞稳态的重要因素，一旦二者比例失衡，孕酮将无法保护机体，继而引发乳腺增生[28]。激素受体在乳腺组织内并不是像想象的那样均匀分布在其中，乳腺组织对每种激素的感应灵敏度也存在差异，因此导致每侧的乳房患病程度大不相同，同理同一侧的乳房不同位置发生患病的程度也大有不同，乳腺疾病以乳腺增生为早期症状，该时期乳房表现为红肿，并伴有疼痛，若乳腺内没有产生包块，这种情况下，乳腺增生在不受到致病因素的威胁下是可以自治的，免疫力低下的动物也存在不能自愈，演变成腺病的现象甚至癌变得风险[29,30]。乳腺增生的判定可以通过镜下检查来判断，当乳腺增生时可见乳腺小叶边缘不整齐且模糊不清，小叶间质细胞内充满大量的纤维组织，同时伴有大量分泌物，小导管也呈现不同程度的扩张，内部存有大量的分泌物[28]。乳腺增生依照组织形态的变化分为早、中、晚三个时期[31]，早期主要以上皮增生为乳腺增生的主要表现形式，乳腺小叶形状不规则且乳腺小叶的数目会有所增加；中期主要是纤维腺病的形成时期，主要是纤维组织增生，小叶结构模糊不清，形状不规则；晚期表现为乳腺硬化，乳腺间质大量增生，小叶结构消失，管泡消失[29]。有研究表明硬化性腺病可以导致浸润性癌，乳腺囊性增生可导致囊肿的形成，有大量的分泌物形成，以上皮瘤样增生，囊肿、乳头状瘤病和腺管型腺病为主要病变[32]。从临床表现来看，乳腺增生症的乳房疼痛症状表现并不明显，没有一定的疼痛规律，也有不表现疼痛的个体。这种疼痛在动物身上表现并不明显，因此增加了腺病发展为囊肿病的几率。总之，一旦乳腺增生发生，其各个时期的变化就会紧密相连，该病虽能自愈但也绝不能忽视。

第二章 鹿茸的药理药效....................................................... 9

第二篇 研究内容............................................................ 11

第一章 肝纤维化动物模型建立及鹿茸干细胞对其治疗 ........................... 11

1.1 材料与方法 ........................................................... 11

1.2 结果 ................................................................. 15

1.3 讨论 ................................................................. 19

1.4 小结 ................................................................. 20

第二章 乳腺增生动物模型及鹿角盘水提物的治疗 ............................... 21

2.1 材料与方法 ........................................................... 21

2.2 结果 ................................................................. 24

2.3 讨论 ................................................................. 27

2.4 小结 ................................................................. 28

第三章 皮肤损伤动物模型及鹿茸尖端提取物的治疗 ............................. 29

3.1 材料与方法 ........................................................... 29

3.2 结果 ................................................................. 32

3.3 讨论 ................................................................. 35

3.4 小结 ................................................................. 36

第三章 皮肤损伤动物模型及鹿茸尖端提取物的治疗

本实验以采用机械损伤的方法建立皮肤损伤动物模型为主，在建模成功后使用鹿茸尖部 RM 层提取物(antler tip extract，ATE)治疗，观看其治疗效果，为后续该动物疾病的研究提供有效的实验模型，也为后续鹿茸在此方面的研究奠定基础。实验从观察其皮肤愈合速度，HE 染色细胞器再生情况，以及免疫组化方法观察血管生长因子 CD31 以及神经生长因子 2F11 的生长情况，鉴定模型是否成功，治疗是否有效果。

3.1 材料与方法

3.1.1 材料

1 实验药物及制剂见表 3-1

结 论

本实验建立肝纤维化动物模型采用了 CC14 诱导的方法，建模成功后使用鹿茸干细胞治疗，观看其治疗效果。结果显示大鼠肝纤维化动物模型建立成功，鹿茸干细胞在其治疗方面有很好的疗效。本实验选用苯甲酸雌二醇联合黄体酮，通过肌肉注射的方法建立动物模型。在建模成功后使用鹿角盘治疗。结果显示大鼠乳腺增生动物模型建立成功，鹿角盘在其治疗方面疗效显著。本实验用打孔器在大鼠背部打孔的方法建立皮肤损伤动物模型，在建模成功后使用鹿茸尖部 RM 层提取物治疗。结果显示大鼠皮肤损伤动物模型建立成功，鹿茸尖部提取物具有促进伤口愈合及皮肤再生的效果。