木瓜蛋白酶对木瓜蛋白酶诱导的MPa形成和单核细胞活化的影响

  ＭＰＡ 中激活的血小板可使单核细胞信号转导通路活化、促使其分泌和表达多种活性因子、显著增强其趋化及黏附能力［５－６］，从而导致内皮损伤并介导炎症细胞黏附［７］。因此，ＭＰＡ 形成是 ＡＳ发生、发展早期的重要病理生理基础之一，而活化单核细胞与血管内皮细胞黏附后进入血管内皮细胞是 ＡＳ发生的关键［８］。因此，研究木瓜蛋白酶对 ＭＰＡ 形成及其诱导的单核细胞活化的抑制作用，有助于阐明其在防治动脉粥样硬化性心脑血管疾病中的新机制。血小 板 活 化 表 达 的 Ｐ－选 择 素 （ＧＭＰ－１４０，ＣＤ６２Ｐ）是反映血小板活化的敏感标志物［９］；活化血小板与单核细胞主要通过 Ｐ－选择素／Ｐ－选择素糖蛋白配 体－１（ＰＳ／ＰＳＧＬ－ｌ）相互 作 用，促进单核细胞－血小板聚集体（ＭＰＡ）形成，因此，Ｐ－选择素既是血小板活化的标志物，也是 ＭＰＡ 形成的关键物质，血小板 Ｐ－选择素表达水平对 ＭＰＡ 形成有决定性 作用［１０］。活化 单 核细胞可 表 达 Ｍａｃ－１受体（即 ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８），因而 ＣＤ１１ｂ是单核细胞活化标志物［１１］。本研究中，木瓜蛋白酶可导致血小板与单核细胞共同孵育后 ＭＰＡ 形成、Ｐ－选择素和 ＣＤ１１ｂ表达明显降低，表明木瓜蛋白酶可抑制活化血小板表达 Ｐ－选择素，并对 ＭＰＡ 形成具有抑制作用，从而导致单核细胞活化减少。因此，木瓜蛋白酶可抑制 ＭＰＡ 形成，并能抑制 ＭＰＡ 中单核细胞活化，从而可能对 ＭＰＡ 参与动脉粥样硬化过程有抑制作用。进一步实验显示，木瓜蛋白酶与血小板孵育后 Ｐ－选择素表达显著降低，与我们早前的研究一致［３］，同 时 ＭＰＡ 形 成 和 ＣＤ１１ｂ 表 达 也 显 著 降低，二者变化趋势一致，这表明 Ｐ－选择素表达水平降低 是 ＭＰＡ 形 成 减 少 的 根 本 原 因 之 一。因此，本结果也进一步印证和部分解释了前述的试验结果。本研究中，木瓜蛋白酶与单核细胞孵育后再加入活化血小板，ＭＰＡ 形成和 ＣＤ１１表达水平也显著降低；这进一步表明木瓜蛋白酶除可通过抑制血小板 Ｐ－选择素表达而抑制 ＭＰＡ 形成，还可能通过对单核细胞的作用，抑制其与血小板Ｐ－选择素 或 者 其 他 途 径 的 结 合，从 而 协 同 抑 制ＭＰＡ 形成。而我 们 进一步 发 现，木 瓜 蛋 白 酶 与血小板和 单 核 细 胞 共 孵 育 后 对 ＭＰＡ 和 ＣＤ１１ｂ的抑制作用远高于其余两种处理方式，表明木瓜蛋白酶可通过抑制血小板活化以及抑制单核细胞的结合两条途径，从而使 ＭＰＡ 形成减少及其诱导的单核细胞活化程度降低更加显著。因此，木瓜蛋白酶可能通过抑制血小板 Ｐ－选择素表达和单核细胞与血小板结合途径而对 ＭＰＡ 形成及其诱导的单核细胞活化有抑制作用，这可能作为其应用于动脉粥样硬化及心脑血管疾病防治的新机制。但木瓜蛋白酶具体通过抑制何种信号转导机制从而抑制 ＭＰＡ 形成和单核细胞活化需要做更深入的 研 究。 若 能 进 一 步 证 实 木 瓜 蛋 白 酶 对ＭＰＡ 及其诱导的单核细胞活的抑制作用并阐明其机制，将有助于提升木瓜蛋白酶在动脉粥样硬化性心脑血管疾病的预防和治疗中应用价值。

 

［１］ Ｓａｈａ Ｐ，Ｍｏｄａｒａｉ Ｂ，Ｈｕｍｐｈｒｉｅｓ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｍｏｎｏ－ｃｙｔｅ／ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｓ ａ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ａｔｈｅｒｏ－ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００９，９（２）：１０９－１１８．

［２］ ｖａｎ Ｇｉｌｓ ＪＭ，Ｚｗａｇｉｎｇａ ＪＪ，Ｈｏｒｄｉｊｋ ＰＬ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ａｍｏｎｇ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，ｐｌａｔｅ－ｌｅｔｓ，ａｎｄ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｆｏｒｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｌｅｕｋ Ｂｉｏｌ，２００９，８５（２）：１９５－２０４．

［３］ 费鲜明，周永列，祁金文，等．木瓜蛋白酶体外对血小板聚集的抑制作用［Ｊ］．中国临床药理学与治疗学，２００９，１４（８）：９０６－９１１